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中心碳代謝途徑(三羧酸循環、糖酵解、磷酸戊糖途徑)

中心碳代謝 (CCM) 途徑相關代謝物包括葡萄糖參與的三羧酸循環 (TCA)、糖酵解途徑 (EMP) 以及磷酸戊糖途徑 (PPP) 等途徑中的幾十種代謝物。

]中心碳代謝

中心碳代謝 (CCM) 傳統意義上包括糖酵解途徑 (EMP)、磷酸戊糖途徑 (PPP) 以及三羧酸循環 (TCA),中心碳代謝是生物體所需 能量的主要來源,并為體內其他代謝提供前體物質。氧化還原反應是主要的化學反應之一,而氧化還原酶是負責催化這些反應的酶。 在三羧酸循環、磷酸戊糖途徑等代謝途徑中,氧化還原酶起著關鍵酶的作用。 葡萄糖是最重要的能源物質,起到氧化供能(主要功能)、為脂類和蛋白質的合成提供所需要的碳源、組成糖脂等生理功能, 其在生物體內的分解途徑主要為中心碳代謝。葡萄糖代謝異常時,可引發機體各種疾病,如糖尿病及其并發癥。此外蠶豆病、糖尿 病狀動脈硬化性心臟病、妊娠糖代謝異常和肝病等疾病的發生也與糖代謝異常密切相關。而乳酸和丙酮酸異常則很可能與糖酵解途 徑有關。其他糖酵解途徑的一些代謝中間體也為脂類、氨基酸及其他一些生物合成提供了前體和原料。此外,細胞主要進行無氧呼 吸而非正常的有氧氧化則是鑒別是否有腫瘤的一個重要因素。

]服務流程

圖片關鍵詞




]樣本量要求

圖片關鍵詞

]生物學重復

相較于其他組學,代謝組學更加靈敏,更接近于真實情況。因此,為保證實驗結果的可靠性,要求更多的生物學樣本重復。我們建議:

臨床樣本,單組不少于30 例重復;

動物樣本,單組不少于9 例重復;

細胞、微生物樣本,單組不少于5 例重復;

其他如植物樣本,單組不少于7 例重復。

]儀器平臺



平臺一:超高效液相色譜串聯質譜聯用儀 1290-6470( Agilent UHPLC-MS/MS)


圖片關鍵詞

靈敏度更高 — 低至亞飛克級的檢測限更清晰的信號和更低的噪音 — 安捷倫噴射流技術采用超熱氮氣

改善離子生成與脫溶劑??伸`活升級為 Agilent iFunnel 技術的安全投資通過彎曲的圓錐形六極桿創新組

件進行產物離子的高效采集和傳輸篩查、確證和定量 — 觸發式多反應監測 (tMRM) 結合了快速、靈敏

的 MRM 定量分析與產物離子譜圖,可用于譜庫檢索、化合物篩查和確證。



平臺二:超高效液相色譜串聯質譜聯用儀 Triple Quad? 5500 系統 ( Waters UPLC-AB Sciex MS/MS)

儀器2.jpgACQUITY UPLC 系統不斷為世界各地的實驗室設立新的基準。UPLC 分離度和靈敏度使科學家們能夠鑒

定出復雜生物樣本中按量極低的化合物。Triple Quad 5500 LC-MS/MS 系統專為提供高級別靈敏度和耐

用性而設計,即便面對最復雜、要求最嚴苛的基質也游刃有余。在環境、靶向定量、臨床研究、食品和

飲料應用所需的多組分定量分析方面表現卓越。



平臺三:超高效液相色譜高分辨質譜聯用儀 Q Exactive ? ( Thermo Scientific Orbitrap MS)

圖片關鍵詞搭配 UltiMate ? 3000 系統,使用 Q Exactive ? 組合型四極桿 Orbitrap 質譜儀可以快速可靠地識別、

定量和確認更多化合物。 本臺式 UHPLC-HRMS 系統將四極桿母離子選擇性與高分辨率和準確質量數

(HRAM)Orbitrap 檢測相結合,提供出色性能和多功能性。 Q Exactive 質譜儀特別適用于非目標或目

標化合物篩查,也能夠實現廣泛的定性和定量應用。



平臺四:氣相色譜質譜聯用儀(GC-MS)7890A/5975C(Agilent GC-MS)

圖片關鍵詞氣相色譜 - 質譜與生俱來的定量準確性 ( 無液相色譜 - 質譜聯用平臺常用的電噴霧離子化所存在的基質

抑制效應 )、超高的穩定性和易用性,以及不俗的靈敏度和高通量,能勝任多數代謝組學和基礎生命科

學研究任務。尤其是那些濃度較高、具有揮發性的物質或雖具有親水性但衍生后具有揮發性的代謝物,

如脂肪酸、糖酵解和三羧酸循環相關代謝物、氨基酸和中長鏈脂肪酸等,都十分適用。



]服務周期

樣本檢測:15-25 個工作日;

數據分析:5-15 個工作日;

服務周期自收到預付款、待測樣本和客戶確認檢測要求之日起計算。


]應用方向

表型組和生理功能研究;

臨床早期預測、診療研究;

病理學研究 ;

天然藥物和藥理研究 ;

中醫現代化和理論研究;

食品科學、安全和營養學研究;

畜牧業和農林業研究;

植物學和環境研究;

毒理學研究。






定量物質


]三羧酸循環(TCA cycle)途徑

NoMetabolite中文名CAS號ClassHMDB ID
1Citric acid檸檬酸77-92-9三羧酸循環(TCA)HMDB0000094
2cis-Aconitic acid順烏頭酸585-84-2三羧酸循環(TCA)HMDB0000072
3Isocitric acid異檸檬酸320-77-4三羧酸循環(TCA)HMDB0000193
42-Ketoglutaric acidα-酮戊二酸328-50-7三羧酸循環(TCA)HMDB0000208
5Succinic acid琥珀酸110-15-6三羧酸循環(TCA)HMDB0000254
6Fumaric acid延胡索酸110-17-8三羧酸循環(TCA)HMDB0000134
7Malic acid蘋果酸97-67-6三羧酸循環(TCA)HMDB0000744
8Oxalacetic acid草酰乙酸328-42-7三羧酸循環(TCA)HMDB0000223


]糖酵解(Glycolysis)途徑

NoMetabolite中文名CAS號ClassHMDB ID
1D-Glucose葡萄糖492-61-5糖酵解(Glycolysis)HMDB0000122
2Glucose 6-phosphate葡萄糖-6-磷酸56-73-5糖酵解(Glycolysis)HMDB0001401
3Fructose 6-phosphate果糖-6-磷酸643-13-0糖酵解(Glycolysis)HMDB0000124
4Fructose 1,6-bisphosphate果糖-1,6-二磷酸34693-15-7糖酵解(Glycolysis)HMDB0001058
5Glyceraldehyde 3-phosphate甘油醛-3-磷酸591-57-1糖酵解(Glycolysis)HMDB0001112
6Dihydroxyacetone phosphate磷酸二羥丙酮57-04-5糖酵解(Glycolysis)HMDB0001473
73-Phosphoglyceric acid3-磷酸甘油酸299804糖酵解(Glycolysis)HMDB0000807
82-Phosphoglyceric acid2-磷酸甘油酸2553-59-5糖酵解(Glycolysis)HMDB0000362
9Phosphoenolpyruvic acid磷酸烯醇式丙酮酸50625糖酵解(Glycolysis)HMDB0000263
10Pyruvic acid丙酮酸127-17-3糖酵解(Glycolysis)HMDB0000243
11L-Lactic acid乳酸79-33-4糖酵解(Glycolysis)HMDB0000190
12Acetyl-CoA乙酰輔酶A72-89-9糖酵解(Glycolysis)HMDB0001206


]
磷酸戊糖 (PP) 途徑

NoMetabolite中文名CAS號ClassHMDB ID
16-Phosphogluconic acid葡萄糖酸-6-磷酸921-62-0戊糖磷酸途徑(PPP)HMDB0001316
2Erythrose 4-phosphate赤蘚糖-4-磷酸585-18-2戊糖磷酸途徑(PPP)HMDB0001321
3Ribose 5-phosphate核糖-5-磷酸4300-28-1戊糖磷酸途徑(PPP)HMDB0001548
4Ribulose 5-phosphate核酮糖-5-磷酸4151-19-3戊糖磷酸途徑(PPP)HMDB0000618
5Xylulose 5-phosphate木酮糖-5-磷酸4212-65-1戊糖磷酸途徑(PPP)HMDB0000868
6Sedoheptulose 7-phosphate景天庚酮糖-7-磷酸2646-35-7戊糖磷酸途徑(PPP)HMDB0001068




服務示例






圖片關鍵詞



部分糖代謝中間產物XIC圖

從上圖我們看出F6P、G6P、F1P、G1P保留時間非常接近,很難將其分離。譜領生物在方法上不斷優化,終于達到將其進行分離的目的,稱得上為國內首屈一指的代謝組學服務的領先品牌。

圖片關鍵詞

F6P、G6P、F1P、G1P分離實例







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部分糖類物質TIC圖

圖片關鍵詞

部分糖類物質標準曲線參考

No.Metaboliteslinear range(ug/ml)R2RSD(%,n=6)
1Lyxose0.02-0.50.999693.86
2Trehalose0.02-0.50.999245.97
3
Mannose0.02-2
0.99942
9.05
4Lactic acid0.02-20.999468.63
5Inositol0.5-200.999674.37
6Citric acid2-1000.999039.69
7Fructose10-2000.999036.54

部分糖類物質測定參數參考





文獻案例



  • Metabolic profiling by gas chromatographymass spectrometry of energymetabolism in high-fat diet-fed obese mice. Plos One.2017.


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